激酶試劑盒怎么用？這份實操手冊，把關鍵步驟講透了！

更新時間：2026-08-25

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　　激酶試劑盒是一種基于激酶酶的特性設計的檢測試劑盒，用于測量激酶反應中所形成的特定產物（如ADP或磷酸化產物）的量，從而間接反映激酶的活性。激酶酶能夠將ATP（三磷酸腺苷）上的磷酸基團轉移到特定的底物上，生成相應的磷酸化產物，同時釋放出ADP（二磷酸腺苷）或AMP（一磷酸腺苷）。通過測定這些產物的生成量，可以評估激酶的活性。

　　激酶試劑盒的使用方法：

　　一、使用前準備

　　‌試劑平衡‌：提前將試劑盒從2~8℃冰箱取出，室溫放置30分鐘，讓所有試劑恢復至操作溫度，避免低溫影響酶活性。

　　‌樣本預處理‌：組織樣本按1:5~10的比例加入提取液冰浴勻漿，8000g 4℃離心10分鐘取上清；細胞樣本冰浴超聲破碎后同條件離心取上清，血清/血漿樣本可直接檢測。

　　‌儀器預熱‌：酶標儀預熱30分鐘以上，將檢測波長調整至340nm，提前設置好對應檢測程序。

　　二、正式操作流程

　　‌工作液配制‌：臨用前將反應液組分充分混勻，哺乳動物樣本需37℃預熱10分鐘，植物/微生物樣本25℃預熱10分鐘。

　　‌加樣反應‌：按照試劑盒說明書操作表，依次在96孔板/比色皿中加入空白對照液、標準液、待測樣本，最后快速加入預熱好的工作液啟動反應。

　　‌讀數記錄‌：在340nm波長下，分別記錄初始時刻和反應結束時刻的吸光度值，計算兩次讀數的差值ΔA。

　　三、結果計算

　　按不同樣本類型套用對應公式，分別計算得到以U/mL、U/mg prot、U/g組織等為單位的激酶活性結果。

　　若ΔA小于0.01，可適當延長反應時間或增加樣本上樣量，重新代入公式計算結果。

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